摘要:對于實驗室有所了解的人相信大家都知道,PCR實驗室最主要的還是各個房間的氣流壓差控制,特別是擴增和產物區的氣流是不能互相串通的,以免引起交叉污染,檢測提取數據重疊失效等。所以我們需要注意氣
對于實驗室有所了解的人相信大家都知道,PCR實驗室最主要的還是各個房間的氣流壓差控制,特別是擴增和產物區的氣流是不能互相串通的,以免引起交叉污染,檢測提取數據重疊失效等。所以我們需要注意氣流和壓差的設計
一、氣流設計
人流物流設計各行其道,避免交叉混雜,整個區域設計一個公用走廊,工作區域之間設計試劑物品傳遞專用窗,做到人物分流。
1、物流:在試劑準備區與標本制備區、標本制備區與PCR擴增區之間,以及擴增區域和純化區之間設計有電子連鎖不銹鋼傳遞窗,以單向進行試劑、標本等物品傳送,配制的試劑通過單向傳遞窗由試劑準備區傳遞到標本制備區,處理過的標本通過單向傳遞窗由標本制備區傳遞到PCR擴增區,按照工藝流程逐次傳遞,避免返流。單向物品傳送系統既保障了標本試劑不受污染,又保障了標本試劑不污染環境。
2、人流:人員通過閘間分別進入各自實驗區域,進出各實驗區域需要在閘間區域更換潔凈工作服,手消毒等。
二、壓差設計
一、氣流設計
人流物流設計各行其道,避免交叉混雜,整個區域設計一個公用走廊,工作區域之間設計試劑物品傳遞專用窗,做到人物分流。
1、物流:在試劑準備區與標本制備區、標本制備區與PCR擴增區之間,以及擴增區域和純化區之間設計有電子連鎖不銹鋼傳遞窗,以單向進行試劑、標本等物品傳送,配制的試劑通過單向傳遞窗由試劑準備區傳遞到標本制備區,處理過的標本通過單向傳遞窗由標本制備區傳遞到PCR擴增區,按照工藝流程逐次傳遞,避免返流。單向物品傳送系統既保障了標本試劑不受污染,又保障了標本試劑不污染環境。
2、人流:人員通過閘間分別進入各自實驗區域,進出各實驗區域需要在閘間區域更換潔凈工作服,手消毒等。
二、壓差設計
PCR實驗室應設計為負壓潔凈室,通過壓差控制,使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染,并且降低擴增產物對人員和環境的污染。各個實驗室與非潔凈區之間的閘間保持正壓,>10Pa,實驗與閘間之間的氣流組織方向為:試劑準備區空氣流向閘間,標本制備區流向閘間,而PCR擴增區氣流方向由閘間流向PCR擴增區,純化區同理;同時按照試劑單向流方向,各個實驗室之間設計不同壓力梯度來實現單向氣流組織方向,由試劑準備區(+20Pa)、標本制備區(+15Pa)、擴增反應一區(-5Pa)、純化區(-10Pa)、擴增反應二區(-20Pa)、到后純化區(-25Pa)壓力逐漸降低,形成單向負壓壓力梯度。
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